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分子互作

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Luciferase

荧光素酶报告基因系统
       生物体内DNA转录成RNA是基因表达的关键过程,基因表达调控主要发生在转录水平。基因分子生物学研究领域的趋势之一是逐渐从基因结构和功能分析转到基因顺式作用元件和转录因子及其转录调控机制上,对基因调控的研究将是今后相当长一段时间内功能基因组学研究的热点之一。双荧光素酶报告基因检测(Dual- Luciferase reporter assay,DR)已成为研究转录因子参与基因调控的有效手段,通过对启动子DNA片段的分析,验证启动子结合元件的反式激活能力,探讨转录因子在信号转导中的分子机制。

服务推荐

● 3‘UTR报告载体验证
 
● 转录因子结合位点与启动子活性验证
 
● lncRNA吸附miRNA验证
 
● circRNA吸附miRNA验证
 

3‘UTR报告载体

       miRNA通常功能性作用于靶基因3’UTR,因此可以将目的基因mRNA3’UTR序列插入载体luciferase报告基因3’端, 通过比较调节miRNA水平引起的报告基因表达改变(监测萤光素酶的活性变化)来定量检测miRNA对目的基因的抑制作用;结合定点突变等方法则可进一步确定miRNA对靶基因3’UTR的直接靶向序列




载体图谱



转录因子结合位点与启动子活性分析

启动子报告克隆在Luc2报告基因上游插入一段1.2~1.5 kb的序列,这段插入序列与基因转录起始位点(TSS)上游大约1.5kb到下游200bp之间的5'侧翼序列一致,可以通过观察荧光素酶的活性来研究启动子对基因的调节作用。
 
可提供预制和定制的pGL-Promoter启动子克隆,包括单报告基因载体系统和双报告基因载体系统。单报告基因载体系统以Rluc、 mCherry或GFP作为启动子的报告基因;双报告基因载体系统以Luc作为启动子报告基因,以Rluc作为信号标准化的内参,可在活细胞中对超过15000种人和16000种小鼠启动子进行实时活性分析。



载体图谱


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